E1-2 低分子化合物の物性とin vitro ADMET評価
低分子化合物のin vitro ADMET（物性、薬物動態、毒性）評価
[1] 支援担当者
| 所属 | ①大阪大学 大学院薬学研究科 | |
|---|---|---|
| 氏名 | ①春田 純一、辻川 和丈、赤井 周司 | |
| AMED 事業 |
ユニット／領域名 課題名 |
ケミカルシーズ・リード 探索ユニット（構造展開領域） 創薬基盤の融合による戦略的イノベーション創出 （構造展開とADMETに基づく創薬研究の推進） |
| 代表機関 代表者 |
大阪大学 春田 純一 |
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| 支援技術のキーワード | in vitro ADMET、薬物動態評価、物性評価、心毒性評価 | |
[2] 支援技術の概要
- 物性、薬物動態評価 ・溶解度、LogD測定
- 心毒性評価 ヒトiPS細胞由来心筋細胞を用いて、Ca fluxにより心室の脱分極から再分極までの時間を表す指標であるQT延長（心電図の QRS 群の開始から T 波終了までの時間であるQT 間隔）等を測定し、心毒性評価を行う。
- 創薬支援機器 In vitro ADMETの各試験項目に応じた実験機器を揃えており、液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry: LC-MS/MS)により測定を行っている。
化合物のリン酸緩衝生理食塩水（PBS）に対する溶解度（100 μM）を測定する。測定に使用する液体クロマトグラフィーの溶出時間から、化合物のLogD値を算出する。
・膜透過性試験
Caco-2細胞や人工脂質膜を用いたParallel Artificial Membrane Permeability Assay（PAMPA）により化合物の膜透過性を測定する。
・代謝安定性試験
ヒト、マウス等依頼に応じ各種の肝ミクロソーム画分を用いて、化合物（未変化体）の代謝安定性を残存率として測定する。
・血漿タンパク結合性試験
ヒト、マウス等依頼に応じ各種の血漿を用いて、血漿タンパク質に対する化合物の結合性を測定する。
・CYP阻害性試験
ヒト肝ミクロソーム画分と6種のCytochrom P450 (CYP)に対するモデル基質を用いて、化合物のCYP阻害性を測定する。
・CYP誘導性試験
化合物によるヒトCYP3A4の誘導能を測定する。
心毒性試験については、Functional Drug Screening System (FDSS)を用いてCa fluxアッセイを行っている。
[3] 支援技術の利用例
In vitroにおいて活性が認められた化合物を用いてin vivoの薬効試験を行う際、期待される薬効が得られないケースがある。その理由として、化合物の溶解度や体内動態に問題があり、生体内の疾患ターゲットに作用していない場合や、化合物の毒性により実験動物に障害が出る場合などがある。よってin vitro薬効試験を行う前に、in vitro ADMET（物性、薬物動態、毒性）の評価を行うことにより、化合物の問題点抽出や、物性や体内動態、毒性面に優れた化合物の選別が可能となる。
[4] 支援担当者の研究概要
製薬会社で行われているin vitro ADMET試験の技術移転を受けて、大阪大学薬学研究科附属創薬センター(Drug Innovation Center：DiNC)の構造展開ユニット（Lead Exploration Units: LEU）に所属する創薬研究者が本支援を担当している。LEUには、製薬企業出向、出身の創薬化学研究者も在籍しており、in vitro ADMET試験結果を受けて化合物の問題点改善の助言を受けられる。またLEUは in vivo薬物動態・安全性試験を実施する薬物動態・安全性試験ユニット(PKSA)や化合物ライブラリー・スクリーニングセンタ―(LiSC)と相互連携体制を構築しており、大阪大学薬学研究科創薬サイエンス研究支援拠点のシームレスな創薬支援が受けられる体制を整えている。
大阪大学大学院薬学研究科附属創薬センター構造展開ユニットHP：http://www.phs.osaka-u.ac.jp/souyaku_kyoten/about/leu.html
